类风湿关节炎患者滑液NK-22细胞对成纤维样滑膜细胞增殖的影响及其机制研究

目的 探讨类风湿关节炎患者滑液NK-22细胞对成纤维样滑膜细胞增殖的影响及其可能机制.方法 采用流式细胞术检测20例RA患者及20例健康对照外周血(peripheral blood,PB)、10例RA患者滑液(synovialfluid,SF)中NK-22细胞(NKp44+CCR6+NK细胞)比例.流式细胞术分选滑液NK-22细胞,鉴定细胞纯度;体外悬浮培养2周,佛波酯(PMA)(20ng/nl)和ionomycin(0.5 μmo1/L)刺激后NK-22细胞培养上清液分别作用于成纤维样滑膜细胞(fibroblastlike synoviocytes,FLS)24 h、48 h、72 h、96 h,MTT法检测成纤维样滑膜细胞增殖情况.ELISA检测NK-22细胞培养上清中IL-22、TNF-α浓度.结果 ①RA患者外周血NK-22细胞比例为0.956%,明显高于健康对照外周血NK-22细胞比例0.003%(P＜0.05);RA患者滑液NK-22细胞比例为4.56%,明显高于自身外周血比例1.315%(P＜0.05).②流式分选2×104个NK-22细胞,细胞纯度＞90%.③PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清作用于成纤维样滑膜细胞24 b、48 h、72 h、96 h可明显刺激成纤维样滑膜细胞增殖(P＜0.05).④PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清中IL-22、TNF-α浓度分别为941.82 pg/ml和368.10 pg/ml.结论 类风湿关节炎患者关节液NK-22细胞可明显刺激成纤维样滑膜细胞增殖,其可能机制与NK-22细胞能分泌白介素-22(IL-22)、肿瘤坏死因子(TNF-α)有关.