微小隐孢子虫miR-2980真核表达载体的构建及初步鉴定
Journal of Anhui Agricultural Sciences(2012)
摘要
[目的]构建微小隐孢子虫miR.2980真核表达载体,并进行鉴定。[方法]从微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组HDNA扩增cp—miR-2980前体,克隆到pMD18-T载体上,经测序鉴定正确后亚克隆到pVAX1载体上,转染HCT-8细胞,提取细胞总RNA,RT—PCR榆测cp-miR-2980的表达。[结果]成功地构建了cp—miR-2980真核表达载体pVAX-miR2980,RT—PCR检测证实其能在真核细胞HCT-8中表达。[结论]构建的真核表达载体pVAX—miR2980能在HCT-8细胞中成功表达cp—miR-2980,为后续研究cp-miR-2980的功能打下了基础。
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关键词
Eukaryotic expression vector,RT-PCR,Precursor,cp-miR-2980
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