南移养殖仿刺参(Stichopus japonicus Selenka)铁蛋白基因的克隆及表达特征分析

采用cDNA文库、RACE、荧光定量PCR和Western blot技术,克隆了南移养殖仿刺参铁蛋白基因的全长序列,并对其表达特征进行了研究。结果表明,南移养殖仿刺参铁蛋白cDNA全长1222bp,包括187bp的5’UTR;513bp的3’UTR和编码173个氨基酸残基的522bp的开放阅读框。诸如铁结合序列标签和铁调控元件等铁蛋白特征结构基元在南移刺参铁蛋白中也高度保守;养殖环境条件的改变影响了铁蛋白在某些组织的表达水平,南方养殖仿刺参肌肉带铁蛋白表达量近乎北方养殖仿刺参的2倍,而在呼吸树中两者表达水平没有明显差异。Western blot揭示本研究获得的铁蛋白多克隆抗体不仅与重组蛋白起强的特异性反应,而且还特异性识别肌肉中的天然蛋白,该抗体可用于仿刺参铁蛋白功能的后续研究。