RP-HPLC同时测定William's E培养基中地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮的含量

目的 建立同时测定William's E培养基中地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮含量的RP-HPLC检测方法,并用该方法研究地塞米松对大鼠原代肝细胞CYP3A的诱导作用.方法 采用Agilent 1100 HPLC系统,Phenomenex色谱柱,以乙腈和磷酸溶液组成的流动相梯度洗脱分离,以酮康唑为内标,流速1.00 mL·min-1,检测波长245 nm,柱温20℃.结果 地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮分别在53～19 291,161～29 318和58～21 091 μg·L-1内呈线性关系;它们的日间和日内精密度均低于15%;地塞米松、睾酮和6β羟基睾酮的最小定量限分别为53.00,161.00和58.00 μg·L-1.结论 该方法简便、准确、可靠,可用于地塞米松作用于大鼠原代肝细胞体系后,地塞米松、CYP3A底物睾酮及其代谢产物6β羟基睾酮在William's E培养基中的浓度测定.