宿半夏SRAP-PCR反应体系优化的研究

目的:研究宿半夏SRAP-PCR分子标记技术的优化体系。方法:采用L16(54)正交设计对宿半夏SRAP-PCR反应体系进行了5因素(dNTPs,Mg2+,模板DNA,引物,Taq酶)4水平优化筛选。结果:半夏SRAP最适合的正向引物是5'-TGAGTCCAAACCGGAAG-3',反向引物为5'-GACTGCGTACGAATTACG-3'。优化的反应体系为25μL反应体系中含有70 ngDNA模板,0.9μmol.L-1引物,0.2 mmoL.L-1dNTPs,1.5～2.0 mmol.L-1Mg2+,2.0 U Taq酶。结论:宿半夏SRAP-PCR体系的建立为今后构建半夏SRAP遗传图谱奠定了基础。