日本血吸虫22.6 kDa膜相关蛋白Th1型表位的免疫学鉴定

目的 鉴定日本血吸虫22.6 kDa膜蛋白(Sj22.6)的Th1型表位,为构建短肽疫苗奠定基础.方法 采用合成肽Sj22.6-P4、无关肽(对照)及PBS免疫C57BL/6小鼠2次(间隔7 d),末次免疫后7～10 d取脾分离单个核细胞,用合成肽sj22.6-P4、无关肽及PBS刺激培养,3H-TdR掺人法检测淋巴细胞的增殖效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其细胞培养上清中IFN-γ、IL-4及IL-2水平.运用流式细胞技术三色标记法检测经合成肽Sj22.-P4、无关肽及PBS免疫2次的C57BL/6小鼠脾淋巴细胞内的Th1、Th2细胞因子.结果 合成肽Sj22.6-P4可刺激经该抗原肽免疫2次的C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖,与PBS组相比,增殖指数(SI)均>2.与无关肽对照组相比,细胞培养上清中IL-2、IFN-γ分泌水平增高,其中IL-2分泌水平差异有统计学意义(P<0.05),IFN-γ差异无统计学意义(P>0.05),而IL-4分泌水平明显降低(P<0.05).合成肽Sj22.6-P4免疫组小鼠脾脏CD4+T细胞中分泌IFN-γ细胞的百分比显著增高,分泌IL-4细胞的百分比显著降低(P均<0.05).结论 合成肽Sj22.6-P4是C57BL/6小鼠特异的Th1型表位.