游离与复合形式的心肌肌钙蛋白Ⅰ快速免疫测定法的建立

目的制备结合游离与复合形式的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)单克隆抗体(mAb),建立快速免疫测定法用于急性心肌梗死(AMI)的诊断。方法mAb通过提纯的人cTnI免疫小鼠和杂交瘤细胞融合技术制备,Western blotting和间接酶联免疫吸附技术(ELISA)鉴定cTnⅠ mAb的特异性。利用筛选的mAb建立双抗夹心模式的ELISA快速免疫测定法。结果制备的mAb仅和游离或复合形式的cTnI结合,与cTn C、cTn T无交叉反应。快速免疫测定法最低检测限1.2μg/L;阳性、阴性质控平均批内CV分别是11.3%和9.3%,批间CV分别是16.4%和12.2%。快速免疫测定法与定量ELISA法同步检测415例样本,符合率92.77%。检测43例AMI病人和42例正常人样本,其诊断敏感性和特异性分别是91.48%和95.45%。结论制备的抗cTnⅠ mAb可以和游离或复合形式的cTnⅠ结合,据此建立的cTnⅠ快速免疫法可方便地应用于AMI实验室诊断。