小G蛋白Rac1在马兜铃酸诱导肾小管上皮细胞损伤中的作用及意义
Journal of Wenzhou Medical College(2013)
Abstract
目的 :探讨马兜铃酸(AA)致肾小管上皮细胞损伤的机制及小G蛋白Rac1在此过程中发挥的作用。方法:以溶剂作为对照组,AA以浓度10μg/mL作用于大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,培养24 h后,WST-1法检测细胞增殖的抑制率;Hoechst 33258染色观察细胞核的形态变化;细胞免疫荧光染色检测Ⅲ型胶原和Rac1蛋白的表达;real-time RT-PCR检测TGF-β1 mRNA的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中Rac1和TGF-β1含量,并分析两者相关性。结果:AA可明显抑制NRK-52E细胞增殖,并诱导细胞凋亡。AA以10μg/mL处理NRK-52E细胞24 h后,TGF-β1 mRNA的表达明显升高(P<0.05),并且细胞外基质成分Ⅲ型胶原的表达明显增加(P<0.05)。此外,AA也可诱导小G蛋白Rac1的表达(P<0.05)。相关分析显示,AA诱导NRK-52E细胞损伤过程中,Rac1的表达量与TGF-β1的分泌水平呈现明显正相关(r=0.967,P<0.01)。结论:AA诱导肾小管上皮细胞出现纤维化样改变,同时伴有Rac1蛋白的高表达;Rac1及其介导的信号通路可能被TGF-β1的高表达所活化,进而参与AA所致的胶原累积过程。
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Key words
renal tubular epithelial cells,Rac1 protein,injury,aristolochic acid,TGF-β1
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