体外诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的研究

目的 观察人骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)体外扩增和定向诱导分化为神经元样细胞的变化,为其临床应用奠定基础.方法 采用密度梯度离心法分离BM-MSCs细胞,用MesencultTM培养基和贴壁培养法培养、纯化和扩增细胞,流式细胞术检测细胞表面CD29和CD90分子表达率.采用20 ng/ml重组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、20 ng/ml新型人表皮生长因子(hEGF)和20 g/L二甲基亚砜(DMSO)、5 mmol/L β-巯基乙醇(BME)分别诱导BM-MSCs;采用免疫组化法检测细胞的神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(VIM)表达情况.结果 BM-MSCs细胞增殖迅速,3周可传代培养;BM-MSCs传十代扩增1～2×103倍.分离和扩增BM-MSCs CD29、CD90强表达率分别为95.02%、93.81%.药物诱导后的BM-MSCs发生轴突等神经元样细胞变化,阳性表达NSE、GFAP、VIM分子.结论 人BM-MSCs能体外培养和扩增,并能定向诱导分化为神经元样细胞.