鸡法氏囊B淋巴细胞中与鸡传染性法氏囊病病毒VP2相互作用蛋白筛选

为了获得鸡法氏囊B淋巴细胞中与鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2相互作用的蛋白质,利用酵母双杂交系统,用IBDV VP2蛋白为诱饵蛋白,筛选鸡法氏囊B淋巴细胞cDNA表达文库。将表达文库质粒转化含IBDV VP2诱饵质粒的酵母感受态细胞,检测报告基因在相应的营养缺陷型培养基(SD/-Leu/-Trp/-His)上表达情况,进一步经β-半乳糖苷酶报告基因检测,筛选到16个阳性克隆。提取阳性克隆质粒,经测序分析获得5个原鸡基因序列,分别是:线粒体DNA、蛋白质O位N-乙酰葡萄糖胺糖基化转移酶、肿瘤蛋白p53结合蛋白、微管解聚相关蛋白质和软骨蛋白硫酸GalNAcT-2。Co-IP试验进一步证实VP2蛋白能够与肿瘤蛋白p53结合蛋白、蛋白质O位N-乙酰葡萄糖胺糖基化转移酶和软骨蛋白硫酸蛋白相互作用。为研究IBDV与宿主细胞相互作用以及细胞受体筛选奠定了基础。