PCV2、PRV、PPV多重PCR检测方法的建立及其应用

根据GenBank中已发表的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)有关基因序列,通过序列比对及参考相关文献,设计了3对特异性引物.通过优化,建立了可同时检测PCV2、PRV及PPV 3种病毒的多重PCR方法.结果表明,该方法能同时检测到PCV2、PRV及PPV的最低核酸量分别为40 pg、72 pg、46 pg.对猪圆环病毒3型(PCV3)、猪细环病毒(TTSuV)、猪流行腹泻病毒(PEDV)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)无扩增.应用该方法对87份临床样品进行检测,PCV2阳性检出率为28.7％ (25/87),PRV野毒检出率为11.5％(10/87),PPV检出率为12.6％(11/87).其中2种以上病毒混合感染阳性率为13.8％(12/87),3种病毒同时感染的阳性率为2.3％(2/87),其结果也与单一PCR结果一致.研究结果提示,该方法可用于PCV2、PRV、PPV三种病原的单一感染或混合感染的鉴别诊断.