锌指蛋白A20促进同种异体大鼠小体积移植肝再生并抑制急性排斥

目的探讨锌指蛋白A20对同种异体大鼠30%小体积移植肝再生与排斥及受体存活时间的影响。方法采用急性排斥组合DA(RT1a)大鼠→Lewis(RT1l)大鼠建立同种异体大鼠30%小体积肝移植模型。75只大鼠均分为A20腺病毒组(A20组)、对照空腺病毒组(rAdEasy组)及对照生理盐水组(PS组)3组。供肝切取后采用离体门静脉灌注法转基因干预,肝脏灌洗后移植。观察受体存活时间及排斥反应,检测移植肝A20表达、肝细胞再生与凋亡、肝血窦内皮细胞(LSECs)中NF-κB活性与ICAM-1 mRNA表达、移植肝浸润单核细胞(LIMCs)总数及自然杀伤(NK)细胞和自然杀伤T(NKT)细胞数以及血清IFN-γ水平。结果A20组受体大鼠存活时间长于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P=0.0018),而PS组大鼠存活时间又长于rAdEasy组大鼠(P=0.0018)。A20促进小体积移植肝再生,肝移植后4dA20组大鼠肝细胞BrdU标记指数高于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P<0.01);A20组大鼠肝细胞凋亡指数低于PS组大鼠和rAdEasy组大鼠(P<0.01)。肝移植术后4d,组织学检测结果显示A20组大鼠移植肝有少量细胞浸润,呈轻度排斥;而PS组和rAdEasy组大鼠移植肝有大量细胞浸润,呈重度排斥。A20能抑制移植后早期(1d)LSECs中NF-κB活性和ICAM-1 mRNA表达。流式细胞术检测结果显示A20能下调移植肝LIMCs数,包括下调NK和NKT亚群细胞数,并下调血清IFN-γ水平(P<0.05)。结论A20能有效促进同种异体大鼠30%小体积移植肝再生,抑制排斥并延长受体存活时间,其功效可能与抑制LSECs中NF-κB活性、抑制LIMCs浸润及减少NK细胞和NKT细胞浸润入肝以及抑制肝细胞凋亡有关。