人EFNB2基因shRNA表达载体的构建及表达

目的:构建针对人EFNB2基因的特异性shRNA真核表达载体,并在宫颈癌Hela细胞中表达。方法:运用基因工程技术构建pEFNB2-shRNA载体,转染Hela细胞,通过RT-PCR及Western blot检测干扰效率,筛选抑制作用明显的载体。结果:构建获得的pEFNB2-shRNA表达载体能够有效抑制EFNB2基因的表达(P<0.05),其中以pEFNB2-shRNA1的抑制作用最强,对EFNB2mRNA表达的抑制率为81.2%,对蛋白表达的抑制率为69.7%。结论:shRNA EFNB2能有效下调EFNB2基因表达水平。