重组真核质粒pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)的构建及表达

Mengyu ZHU,Xingjie GAO,Baoxin QIAN,Lin GE,Hong ZHAO,Xiujuan ZHAO,Jie YANG

Tianjin Medical Journal（2011）

引用 2|浏览30

暂无评分

摘要

目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain (1～5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法:以重组质粒pEGFP-C1-G3BP为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切法将目的片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的蛋白的融合表达情况.结果:以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达.结论:重组pEGFP-C2-hG3BP-Domain(1～5)质粒成功构建并表达.

查看译文

关键词

Western recombinant fusion proteins restriction mapping,green fluorescent proteins plasmids gene expression blotting

AI 理解论文

溯源树

样例

生成溯源树，研究论文发展脉络

Chat Paper

正在生成论文摘要