骨桥蛋白基因对大肠癌细胞增殖、侵袭及Akt磷酸化的影响

目的探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因对大肠癌细胞侵袭的影响及机制。方法以人大肠癌Colo 205细胞为模型,应用OPN基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理后,采用荧光实时定量PCR检测OPN基因mRNA水平,采用软琼脂集落培养试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖能力,采用Boyden小室模型方法检测癌细胞侵袭能力,采用蛋白质印迹检测癌细胞Akt磷酸化水平。结果 OPN转染组癌细胞OPN mRNA和蛋白水平明显被抑制,且与时间和浓度相关。与空白对照组比较,OPN转染组细胞所形成的软琼脂集落数和穿膜细胞数明显减少,且呈浓度依赖性。蛋白质印迹检测发现,OPN转染组细胞Akt磷酸化水平明显下调。结论 OPN基因转染可明显下调大肠癌细胞的增殖和恶性侵袭能力,下调Akt磷酸化水平,是OPN基因转染下调癌细胞的增殖和恶性侵袭能力重要机制之一。