核基质蛋白SAFB真核表达载体的构建及其鉴定

目的 构建人SAFB基因真核表达裁体,为SAFB基因功能研究提供研究基础.方法 设计人SAFB特异性引物,提取人正常结直肠上皮组织总RNA,应用RT-PCR方法提取人SAFB cDNA,通过双酶切及测序鉴定,将SAFB克隆至pcDNA3.1(-),构建人SAFB基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)/SAVB,转染SW480细胞,用Western Blot技术检测目的蛋白的表达.结果 成功扩增人SAFB全长cDNA,双酶切鉴定和测序结果证实成功构建pcDNA3.1(-)/SAFB真核表达载体,转染细胞后,可检测出分子量约为140KD的目的蛋白.结论 获得人SAFB基因全长cDNA并成功构建了SAFB真核表达栽体,证实pcDNA3.1(-)/SAFB转染SW480细胞后可表达SAFB蛋白,为深入研究SAFB基因在肿瘤发生发展中的作用提供了基础.