用基于TaqMan探针的Real-time PCR技术定量检测副溶血弧菌
Wei sheng wu xue bao = Acta microbiologica Sinica（2005）
Abstract
副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌,传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性,建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要.根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针的Real-time PCR方法.通过对9种细菌(12株菌株)的DNA进行扩增,结果所有4株副溶血弧菌均可产生扩增曲线,其他8株非副溶血弧菌均不产生扩增曲线,证明了引物和探针具有很高的特异性.细菌纯培养物品和人工布菌的检测敏感度分别为1 CFU/PCR反应体系和10 CFU/PCR反应体系,相关系数均为0.99(r2=0.99),整个试验可在1h内完成.建立的方法可用于海产品中副溶血弧菌的快速定量检测.
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Key words
real-time pcr,quantitative detection,taqman,gyrb gene of vibrio parahaemolyticus
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