腺病毒介导MDA-7／IL-24选择性促进肝癌细胞的凋亡和增殖阻滞

目的观察MDA-7／IL-24基因对不同p53状态人肝癌细胞HepG2、MHCC97L以及Hep3B和正常的肝细胞L02的选择性杀伤作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础。方法将携带入MDA-7／IL-24基因的腺病毒Ad．mda-7感染人正常肝细胞L02和不同p53状态的肝癌细胞HepG2、MHCC97L、Hep3B。通过逆转录聚合酶链反应方法观察。MDA- 7／IL-24基因的表达,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中MDA-7／IL-24蛋白的浓度,通过四甲基偶氮唑盐染色法及Hoechst染色观察MDA-7／IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用,Annexin-V和碘化丙啶双染后流式细胞仪检测细胞的凋亡,应用流式细胞仪检测细胞周期。结果复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7／IL-24在肝癌细胞株HepG2, MHCC97L和Hep3B以及正常细胞L02中高效表达。细胞培养上清液中有MDA-7／IL-24蛋白表达。MDA-7／IL-24能明显抑制各种肝癌细胞的生长,Hoechst染色提示MDA-7／IL-24促进肝癌细胞的凋亡,流式细胞仪提示MDA-7能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无影响,细胞周期分析提示MDA-7／IL-24阻滞肝癌细胞在G2／M期,同时对正常的肝细胞没有促凋亡作用和增殖阻滞作用。结论复制缺陷型重组腺病毒载体Ad．mda-7能介导MDA-7／IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达,选择性地杀伤肝癌细胞HepG2、MHCC97L和Hep3B,促进细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡而与肿瘤细胞的P53基因的状态无关,同时对正常的肝细胞L02无任何毒性作用。