重组牛乳铁素融合蛋白的原核表达及其抑菌活性分析

为建立生物合成牛乳铁素的方法,根据牛乳铁素氨基酸序列确定其编码序列,利用PCR技术获得基因扩增产物,接着将该产物与编码鱼腥蓝细菌Anabaena sp.PCC7120的DNA聚合酶基因dnaENI中断裂的内含肽基因Asp dnaEIn的PCR产物进行重组PCR,将获得的重组融合基因再克隆到表达载体pET-28a构建重组融合表达质粒。结果显示,融合表达质粒转化大肠杆菌后经诱导能在大肠杆菌表达宿主Escherichia.coli BL21(DE3)中大量表达,且细胞裂解液与纯化的Anabaena sp.PCC7120中含断裂内含肽Asp DnaEIc的DNA聚合酶蛋白DnaECI混合反应后对金黄色葡萄球菌具有抑制作用。