人真皮成纤维细胞的分离培养及鉴定

目的对人真皮成纤维细胞(hFbs)进行分离培养及鉴定,为组织工程复合皮肤的构建提供种子细胞。方法利用组织块培养法、消化传代纯化培养hFbs,通过细胞形态的观察及免疫细胞化学、流式细胞术等方法对其进行鉴定。结果经组织块培养法获得的细胞可以传代培养,从P1代到P6代细胞形态保持一致,呈纤维细胞样生长;免疫细胞化学检测可见波形蛋白(vimentin)呈阳性反应,通过流式细胞术检测P3及P6代的细胞vimentin阳性表达量均达到95%以上,角蛋白15(cytokeratin 15)呈阴性表达。结论成功建立体外稳定培养hFbs的方法,为组织工程皮肤的研究提供了理论与实验基础。