SHV-12型超广谱β-内酰胺酶的原核表达及免疫原性分析
Journal of Ningxia University(Natural Science Edition)（2011）
摘要
利用PCR技术扩增了SHV-12 ESBLs目的基因,并将目的基因亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-SHV-12转化于表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳分析.结果表明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相对分子质量为30 KDa,经蛋白质印迹检测证明具有特异性条带,经头孢硝基噻吩显色反应表明获得了有活力的ESBLs,包涵体作为免疫抗原免疫Balb/c小鼠,3次免疫后利用间接ELISA法测定免疫效价达到1∶106.获得了可靠而稳定的免疫原.
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关键词
cloning and expression,antibody titer,extended-spectrum β-lactamases(ESBLs)
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