系统性红斑狼疮皮损角质形成细胞体外培养及细胞学特性观察

[目的]体外培养系统性红斑狼疮(SEE)皮损部位角质形成细胞(KC),观察其细胞学特性.[方法]原代培养SLE皮损和正常皮肤的角质形成细胞,倒置显微镜观察细胞的形态特点.免疫荧光法进行角蛋白检测并计算细胞纯度:两步消化法纯化细胞;CCK-8(cell counting Kit-8)评价细胞的增殖情况,绘制生长曲线.流式细胞仪观察细胞的生长周期和凋亡情况.[结果]使用K-SFM(serum.free keratinocyte medium)无血清培养基能成功体外培养SLE皮损的角质形成细胞,呈铺路石样.结合人工纯化,能达到>95%的纯度;与正常对照相比,SLE皮损角质形成细胞进入指数生长期较迟(7 d vs.4 d),但进入后增长迅速,S期比例为:(40.68±1.81)%%vs.(34.43±1.24)%(P<0.05);凋亡率高:(6.08±0.72)%眠(4.32±0.44)%(P<0.05).[结论]SLE皮损角质形成细胞培养难度大,细胞的生物学行为存在异常,可能为SLE发病的独立、始发因素,其致病机制值得深入研究和探讨.