Cortactin功能性结构域GST融合蛋白的表达和纯化

目的:制备cortactin功能性结构域(NTA和ABR)GST融合蛋白,用于后续研究NTA和ABR多肽分子对肿瘤细胞的侵袭转移能力的影响。方法:通过从cortactin基因cDNA克隆中扩增获得cortactin功能性结构域(NTA和ABR片段),经双酶切和连接后将其分别插入载体pGEX-4T-2中获得重组质粒。将重组质粒转化入感受态菌,诱导表达,蛋白粗提后纯化。结果:PCR扩增后获得和预期一致的cortactin功能性结构域(NTA和ABR片段),通过测序证实该两片段正确插入表达载体。纯化的蛋白作SDS-PAGE电泳,证实蛋白的完整性和纯度良好。结论:成功地获得cortactin功能性结构域(NTA和ABR)GST融合蛋白。