早熟凝集染色体技术在核事故应用中的方法学改进

目的 研究早熟凝集染色体(PCC)技术的方法学改进,为核和电离辐射事故时快速估算受照生物剂量提供良好的读片标本.方法 取人的肘静脉血,以常规的PCC培养方法为标准,通过对培养中加入化学诱导剂花萼海绵体诱癌素A(CA)、有丝分裂阻断剂秋水仙素来研究收获PCC的形态和长度；通过对制片方法的改进来增强收获的PCC形态达到良好的状态；加入苦杏仁苷和细胞松驰素B(Cyt-B)2种细胞增殖促进剂在60Coγ射线大剂量照射的条件下,对促进周围血淋巴细胞增殖的作用.结果 ①以加入CA为35 nmol/L、秋水仙素30 nmoL/L培养50 h后收获的PCC形态与结构最好,符合长度∶宽度比例要求的细胞率最高(47.4%)；②制片中增加低渗液的用量至8ml和延长时间至30 min并在37℃水浴下进行,同时改变固定液的比例为2:1能增强收获良好的PCC标本；③照射0～20.0 Gy后,以质量浓度苦杏仁苷为150 mg/L和Cyt -B为0.2 mg/L共同培养收获的细胞增殖率最高,常规法培养最低.结论 本研究的方法学改进可快速获得良好的PCC读片标本,为核和电离辐射事故时快速估算受照的生物剂量提供方便.