AoGDW肽固相合成工艺研究

用Wang树脂,以HBTU/HOBT/DIEA(1∶1∶2),HOBT/DIC(1∶1)为缩合剂,DCM、DMF、NMP、THF、DMF/DCM(1∶1)、DMF/DCM(1∶7)为溶剂,Fmoc-氨基酸物质的量为4倍,不同的反应浓度,从而筛选出AoGDW肽合成的最佳缩合剂、溶剂、反应浓度。树脂-肽复合物用TFA/H2O/TIS(95∶2.5∶2.5)为裂解液,粗肽经ESI/MS鉴定,用RP-HPLC分离纯化。结果证明:Wang树脂在以HOTU/HOBT/DIEA(1∶1∶2)为缩合剂,以DCM,DMF/DCM(1∶1),DMF/DCM(1∶7)为溶剂,反应浓度在0.124~0.248 mol/L时,氨基酸的连接率及肽的最终产率最高。粗肽经ESI/MS分析,证明相对分子质量与理论值一致;经RP-HPLC纯化,获得纯度为99.7%的目标肽。