尼帕病毒G和F蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为制备抗尼帕病毒(NiV)G和F蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以表达NiV G和F蛋白的真核重组表达质粒pCAGG-NiVG和pCAGG-NiVF分别免疫BALB/c小鼠,采用常规技术制备杂交瘤细胞;以表达G和F蛋白的重组牛痘病毒(rWR-NiVG、rWR-NiVF)分别感染BHK细胞,通过间接免疫荧光(IFA)筛选阳性克隆,分别得到一株抗G和抗F蛋白的MAb,命名为G3E9和F2G1。两株MAb均为IgM亚型/κ链。IFA检测G3E9和F2G1杂交瘤细胞诱导的小鼠腹水中IgM抗体效价均为1∶1 024。细胞融合抑制试验表明两株MAb均具有抑制NiV G和F蛋白共表达诱导细胞融合的功能;并且采用表达NiV G和F蛋白的水泡性口炎伪型病毒进行的中和试验表明两株MAb具有一定的中和活性。