PCR佐剂在单细胞PCR技术中的优化应用

目的:探索一种优化的单细胞PCR佐剂,应用于分子病理学研究中单细胞基因的检测。方法:从淋巴结反应性增生冷冻组织切片中,应用激光捕获显微切割获取单个淋巴细胞,优化单细胞PCR反应体系进行actin基因检测。对照组不添加PCR佐剂,实验A、B、C组分别添加PCR佐剂二甲基亚砜、甘油、牛血清白蛋白。结果:对照组、实验A、B、C组的单细胞扩增阳性率分别为5%,7.5%,10%,45%,对照组和实验A、B组的单细胞扩增阳性率比较无显著性差异(P>0.05),而实验C组的单细胞扩增阳性率显著性高于对照组和实验A组(P<0.01)。结论:牛血清白蛋白是最佳的单细胞PCR佐剂,显著提高了单细胞PCR的敏感性、特异性和稳定性。