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存贮温度对CCM1细胞培养液中游离氨基酸浓度的影响

Chemistry & Bioengineering(2009)

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摘要
以AQC为柱前衍生剂,采用氨基酸专用分析柱、四元梯度洗脱、紫外检测的方法测定CCM1细胞培养液在不同温度(4℃和37℃)存贮的条件下,17种游离氨基酸的浓度。结果表明,该法分离细胞培养液中游离氨基酸的效果较好,在50~1000μmol.L-1范围内线性关系良好,相关系数R2在0.9718~0.9991之间,日内精密度RSD≤0.0917%,日间精密度RSD≤0.0981%。CCM1培养液在不同存贮条件下,随着时间的延长,其中部分游离氨基酸的浓度发生了明显改变:在4℃下存贮28 d,Asp、Ser、His的浓度分别下降了44.66%、53.79%和53.44%,其余游离氨基酸浓度下降率≤20.25%;在37℃、5%CO2的环境中存贮6 d,17种游离氨基酸浓度下降率≤19.57%。提示对于细胞培养要求较高的实验过程,应配制新鲜培养液,并及时进行细胞换液。
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关键词
culture medium,free amino acid,high performance liquid chromatography(HPLC)
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