米非司酮对人羊膜上皮细胞水通道蛋白8表达的影响

目的 观察米非司酮对人羊膜上皮细胞水通道蛋白 8(AQP8)表达的影响,探讨药物调控羊膜上皮细胞AQP8表达的可行性.方法 将体外培养的人羊膜上皮WISH细胞分为不同浓度米非司酮作用48 h组和单一浓度米非司酮作用不同时间组,前者培养基中分别加入终浓度为0.1、1、5、10、15μmol/L的米非司酮,培养48 h;后者培养基中加入终浓度为10 μmol/L的米非司酮,分别培养6、12、24、36、48 h,同时2组均设加入含0.01%二甲基亚砜(DMSO)完全培养液的对照组.采用免疫荧光细胞化学方法检测10 μmol/L米非司酮作用48 h后细胞AQP8蛋白的分布;RT-PCR和蛋白质印迹技术分别检测不同浓度米非司酮作用组和米非司酮作用不同时间组各组细胞AQP8 mRNA和蛋白的表达水平.结果 免疫荧光细胞化学检测显示,米非司酮作用后WISH细胞细胞质内及细胞膜上AQP8蛋白黄绿色荧光信号较对照组均明显减弱.在不同浓度米非司酮作用组中,除O.1 μmol/L 组外,其余各组细胞的 AQP8 mRNA和蛋白表达水平分别与对照组相比均明显减弱(均P