丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响.方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率.HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率.HSC与丹皮酚1.66 ～69.7 mg·L-1作用48h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性.丹皮酚1.66 ～49.8 mg·L-1与HSC作用24h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48h用流式细胞术检测细胞周期.结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6 ～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P＜0.05),作用48h时IC50值为105.4 mg·L-1.锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P＜0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P＜0.05).丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48h无明显细胞毒性.流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24h能显著促进HSC细胞凋亡(P＜0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P＜0.05).丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48h可调节细胞周期,Go/G1期细胞增加(P＜0.01),S期细胞减少(P＜0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P＜0.05).结论 丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一.