60%氧暴露对早产鼠AECⅡ增殖的影响及CGRP的干预作用

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对60%氧暴露早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)生长增殖的影响。方法原代分离培养孕19d早产鼠AECⅡ,随机分为4组:空气组、高氧组、高氧CGRP组、高氧CGRP拮抗剂组。空气组和高氧组分别在氧体积分数为21%的空气和60%的氧气中暴露24h;高氧CGRP组在暴露前加入CGRP,高氧CGRP拮抗剂组在暴露前同时加入CGRP和CGRP受体拮抗剂,再置于氧体积分数为60%的氧气中培养24h。采用MTT比色法和流式细胞术测定细胞增殖能力和细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光技术测定表面活性蛋白C(SPC)的mRNA及蛋白表达。结果与空气组比较,高氧组细胞存活率下降,G0/G1期细胞比例增高,G2/M及S期细胞比例降低,SPC mRNA及SPC蛋白表达低下(P均<0.01)。而CGRP干预可促进高氧暴露AECⅡ的增殖能力,使S及G2/M期细胞增多,并提高AECⅡ的SPC mRNA及SPC蛋白表达水平。结论60%氧暴露24h可抑制早产鼠AECⅡ增殖,而CGRP可促进AECⅡ增殖,部分解除高氧对AECⅡ的抑制作用。