紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞的研究

目的:观察紫杉醇对3种不同p53基因型肺癌细胞的作用.方法:以不同浓度紫杉醇(0.1、1.0、10、100、1 000nmol/L)分别作用肺癌细胞A549、H322、H1299不同时间(4、12、24、48、96 h),实验同时设阴性对照组(不加紫杉醇)和空白对照组(只加细胞培养液).采用MTT、流式细胞术、Western blotting检测细胞的生长及细胞周期、凋亡、乙酰化微管蛋白、p53蛋白等指标变化.结果:紫杉醇对3株肺癌细胞的生长抑制作用均随着作用时间的延长而增强(P＜0.05)；不同浓度紫杉醇对3株细胞生长的影响也存在差异(P＜0.05).3株细胞中A549细胞半数抑制浓度相对较低,但3株细胞间对紫杉醇敏感性的差异无统计学意义(P＞0.05).紫杉醇10 nmol/L作用时,3株细胞G2/M期变化趋势基本一致,1 000 nmol/L作用时,A549细胞G2/M期比例与作用时间呈正相关(P＜0.05),H322和H1299的G2/M细胞于24 h达高峰,作用后期H1299出现异常多倍体；同浓度紫杉醇作用的各株肺癌细胞的凋亡呈时间依赖性,但1 000 nmol/L组诱导的细胞凋亡比10 nmol/L组更晚出现.浓度依赖性实验中,10 nmol/L诱导凋亡比例最高；紫杉醇浓度≤100 nmol/L时,G2/M期比例随浓度增加而增高(P＜0.05)；紫杉醇浓度≥100 nmol/L时,各肺癌细胞株G2/M期比例间的差异无统计学意义.凋亡和G2/M期阻滞无相关性(P＞0.05).紫杉醇作用后,A549细胞p53蛋白呈浓度和时间依赖性增加,H322细胞p53蛋白无明显变化.3株细胞乙酰化微管蛋白均较对照组显著上升(P＜0.05).结论:紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性.紫杉醇可增加野生型p53蛋白表达,诱导p53依赖和非p53依赖的两种凋亡途径,p53基因型影响了高浓度紫杉醇对肺癌细胞的周期阻滞作用,但对紫杉醇化疗敏感性无显著影响.