RNAi阻断GATA-3表达治疗小鼠过敏性鼻炎的实验研究

目的探讨以GATA-3为基因治疗靶标,在体内实验阶段评估RNAi技术抑制Th2极化反应,阻止过敏性鼻炎发展的潜在治疗作用。方法采用脂质体鼻腔给药系统,将在体外实验中获得的针对GATA-3基因抑制效果最明显的特异性siRNA重组质粒载体Si338应用于小鼠过敏性鼻炎模型上,借助RT-PCR、ELISA、流式细胞术和HE染色分别检测鼻腔黏膜GATA-3的mRNA水平和相关炎症因子变化,以及Th1/Th2细胞亚群漂移和炎症细胞浸润的改变。结果①HE染色后,显微镜下观察到过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜水肿,上皮脱落,炎症细胞浸润增加和嗜酸性粒细胞数均高于正常对照组,经RNAi治疗后,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数明显下降。②RT-PCR显示s,iRNA质粒载体有效下调Th2极化条件下的GATA-3 mRNA含量。③流式细胞术检测显示,过敏性鼻炎小鼠脾脏中,Th1/Th2细胞亚群出现漂移,Th1细胞的相对数量明显减少,Th2细胞相对数量明显增加,RNAi治疗后,Th1/Th2比率出现逆转。④ELISA显示过敏性鼻炎小鼠外周血中I,L-4与IL-5含量增高,Si338组IL-4含量明显降低。结论在获得高效、特异性干涉序列基础上,针对疾病上游基因,诸如GATA-3,给予RNAi技术的靶向治疗能够显著缓解过敏性鼻炎动物模型中鼻黏膜的Ⅰ型变态反应。本研究为今后前瞻性地探索siRNA基因治疗过敏性鼻炎提供了具有潜力的研究思路和可行的实验方法。