肽刺激培养法体外扩增巨细胞病毒特异细胞毒性T淋巴细胞

目的 研制一种扩增特异细胞毒性T淋巴细胞频数的方法.方法 用不同浓度的巨细胞病毒(CMV)特异的表位肽pp65刺激人外周血单个核细胞(PBMCs)使CMV特异CTLs在PBMCs中的百分比增高.用四聚体-PE和CD8-FITC双标记PBMCs中的CMV特异CTLs,然后用流式细胞仪分析.结果 这个方法能有效扩增CMV特异CTLs,使在外周血中占淋巴细胞百分比不到1%的CMV特异CTLs迅速增加到接近20%,占CD+8 T淋巴细胞的40%以上,并能从单份血样中获得大量特异CTLs用于流式分析.结论 肽刺激培养法简便、易操作,能有效扩增CMV特异CTLs,使不同人的数据更容易对比和连续的评价.该方法也为过继性免疫疗法治疗巨细胞病毒疾病打下了基础.