人牙周膜干细胞矿化诱导分化的实验研究

目的:体外分离纯化人牙周膜干细胞,研究其体外矿化能力,为牙周组织工程提供可靠的种子细胞来源。方法:采用有限稀释法克隆分离纯化人牙周膜干细胞,将获得的第5代细胞用矿化液连续培养,观察矿化情况,进行矿化结节Von kossa染色;通过免疫组织化学染色技术检测诱导后细胞骨黏连素(ON)、骨桥蛋白(BSP)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)的表达。结果:人牙周膜细胞在体外可以叠层生长,形成肉眼可见的灰白色结节,Von kossa染色显示结节内有钙盐沉积,该细胞诱导21 d后有矿化相关蛋白COLⅠ、COLⅢ,BSP、ON的阳性表达。结论:人牙周膜干细胞在体外矿化液作用下出现向成骨细胞的分化。