HRSV在人二倍体细胞上的生长动力学研究

目的研究人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus,HRSV)在人二倍体KMB17细胞上的增殖动力学,为病毒的体外细胞大量繁殖创造条件.方法将HRSVA2株接种到人二倍体KMB17细胞,采用微量细胞病变法在不同时间检测病毒的感染性滴度,绘制一步生长曲线;同时,以不同剂量的病毒感染复数(MO)I感染细胞,分析细胞开始出现病变及所有接种孔全部病变的时间,并检测收获物的感染性滴度,确定最佳MOI.结果HRSV在KMB17细胞上的感染增殖一步生长曲线分析提示,该病毒在培养到2～4d后开始病变,第5～10天呈对数增长,其增殖高峰为10～11d,10d后增殖趋于平缓;接种MOI越大,开始出现病变时间及完全病变的时间都越早.接种100、10及1个MOI时,接种后2～3d均出现病变,第6天时三组细胞病变率均为100%,感染性滴度为7.37～7.50lgCCID50/mL,三组之间无明显的差异;接种在0.1、0.01及0.001个MOI时,接种后第4天有30%的细胞出现病变,第8～9天时细胞病变率也均达到100%,感染性滴度在6.50～7.0lgCCID50/mL之间;当接种在0.0001个MOI以下时,接种后第5～6天才出现病变,至第14天时细胞仍未能完全产生病变,发生病变的细胞收获物其感染性滴度仅为6.00～6.12lgCCID50/mL.结论HRSVA2株病毒在KMB17细胞内能良好增殖,其增殖高峰为10～11d,收获物感染性滴度最高可达7.50lgCCID50/mL,接种最佳MOI约为0.1～1.0.