阿尔茨海默病磁共振探针前体BSA-(Gd-DTPA)n-CR的合成、表征及初步评价

目的合成阿尔茨海默病(AD)的磁共振探针前体BSA(-Gd-DTPA)n-CR,初步评价其体外弛豫性能及对APP/PS1转基因小鼠脑组织切片内Aβ斑块的靶向性能。方法按文献方法合成并纯化好适量的BSA-(Gd-DTPA)n备用。刚果红与BSA-(Gd-DTPA)n比例为1:40,在pH4.1的Britton-Robinson缓冲体系反应生成BSA-(Gd-DTPA)n-CR,生成产物用LH20凝胶柱分离。BSA-(Gd-DTPA)n-CR通过近红外探针KODAK X-SIGHT670标记,尾静脉给药后于不同时间点进行活体近红外荧光成像,初步评价药物在正常小鼠体内的生物学分布及代谢状况;动态扫描结束后,心脏生理盐水灌流后取心、肝、脾、肺、肾和脑等器官进行离体近红外荧光成像,对药物的血脑屏障通透性进行定性评价。正常小鼠BSA-(Gd-DTPA)n-CR增强MRI成像评价前体药物代谢及体内分布。探针前体与APP/PS1转基因小鼠脑组织切片体外染色证实其Aβ斑块的靶向性能,并与Aβ斑块的免疫组化结果对比,探讨其靶向灵敏性及特异性。结果 32℃条件下0.5T磁场环境中BSA-(Gd-DTPA)n-CR在纯水中的弛豫率为6.26mmol/L-1s-1,是小分子Gd-DTPA的2倍还多(2.87mmol/L-1s-1)。成功合成了新型的探针前体BSA-(Gd-DTPA)n-CR,其体外T1弛豫性能较Gd-DTPA有明显提高。与抗Aβ蛋白特异性免疫组化染色对比提示,该探针前体具有Aβ蛋白靶向性。近红外荧光成像结果显示,该前体尚不能通过血脑屏障。结论本研究成功合成了AD探针前体BSA-(Gd-DTPA)n-CR,该配合物具备长循环特性,且具备Aβ蛋白特异性靶向性,但尚不能通过血脑屏障;其上具备的多个可供修饰的氨基,可进一步修饰使其成为一个完整的探针分子,因此BSA-(Gd-DTPA)n-CR是一种很有潜力的探针前体。