局部应用CpG ODN治疗变态反应性结膜炎的实验研究

目的探讨局部应用CpG ODN对小鼠实验性变态反应性结膜炎的治疗作用和相关机制,以期为变态反应性结膜炎提供新的治疗策略。方法随机将24只6~8周雌性Balb/c小鼠分为4组:CpG ODN组、GpC ODN组、PBS组和正常对照组,每组各6只,鸡卵蛋白(OVA)免疫Balb/c小鼠建立变态反应性结膜炎动物模型,首次激发诱导变态反应性结膜炎成功后第4天双眼连续3d分别滴入CpG ODN(5g·L-1)、GpC ODN(5g·L-1)和PBS各10μL,治疗后的第4天观察眼部临床症状后处死动物,检测结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的变化、血清中IgG1、IgG2a含量和细胞分泌IL-4的水平,流式细胞仪对培养细胞的分子表达和含量进行分析。结果与GpC ODN对照组和PBS对照组比较,CpG ODN治疗组的主要指标变化为:(1)结膜组织切片中嗜酸性粒细胞和中性粒细胞的数量明显减少,嗜酸性粒细胞每张切片上的细胞数分别为:CpG ODN组(10.00±0·92)个,GpC ODN组(17.00±1.06)个,PBS组(20.00±1·26)个。中性粒细胞每张切片上的细胞数分别为:CpG ODN组(15.00±1.36)个,GpC ODN组(32.00±2.83)个,PBS组(29.00±1.58)个;(2)血清中IgG2a的含量增加,IgG1/IgG2a比例下降(P<0·01);(3)细胞培养上清中的IL-4分泌下调,CpG ODN组(20.702±1.688)ng·L-1,GpC ODN组(27.201±1·274)ng·L-1,PBS组(30.534±2.576)ng·L-1;(4)CD4+CD25+和CD11c+CD80+MHCⅡ+的细胞比例有所增加,其中CD4+CD25+细胞所占比例在CpG ODN组为9·55%,GpC ODN组为5.00%,PBS组为5.92%.CD80和MHCⅡ+共表达的细胞占CD11c+细胞比例在CpG ODN组为5.71%,GpCODN组为3.51%,PBS组为2.18%.但CpGODN治疗组对变态反应性结膜炎早期临床症状的改善没有明显作用(P>0·05)。结论眼部应用CpG ODN能够逆转实验性变态反应性结膜炎小鼠激发阶段体内的Th2型应答,改变血清中抗体亚型,减轻结膜组织局部的晚期病理反应,对实验性变态反应性结膜炎具有显著的治疗作用。