钴原卟啉诱导大鼠骨髓间充质干细胞血红素加氧酶-1过表达及其对IL-10分泌的影响

本研究探讨不同浓度钴原卟啉(CoPP)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSC)血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)过表达的效应关系及其对BMMSC分泌IL-10的影响.分离培养BMMSC,用流式细胞术检测BMMSC中CD34、CD45、CD44和CD71的表达;应用茜素红染色和油红染色检测BMMSC向成骨及成脂诱导情况.BMMSC随机分为4组,分别置于CoPP浓度为0、25、50和75 μmol/L的培养液中进行诱导.用MTT法分析BMMSC增殖情况.采用RT-PCR检测各试验组HO-1的表达水平,筛选出诱导HO-1表达上调的最适合的CoPP浓度.用ELISA试剂盒检测各组IL-10的分泌量.结果表明,体外分离培养的BMMSC中CD34、CD45表达呈阴性,CD44和CD71表达呈阳性;BMMSC经成骨及成脂诱导后出现钙沉积和脂滴,茜素红染色和油红染色呈阳性.各个浓度的CoPP对细胞增殖无显影响,CoPP 50 μmol/L能强烈诱导BMMSC的HO-1表达,其在试验组的表达高于对照组,与此同时IL-10分泌量也较对照组增多.结论:CoPP对细胞增殖活性无促进作用,CoPP 50 μmol/L是诱导BMMSC HO-1表达上调的最适合的浓度,HO-1表达上调可诱导IL-10分泌增加.