结缔组织生长因子对足细胞相关蛋白表达的影响

目的:观察结缔组织生长因子(CTGF)对体外培养的足细胞整合素连接激酶(ILK)、nephrin和desmin表达以及细胞表面形态的影响,以进一步探讨CTGF介导足细胞损伤的机制. 方法:不同浓度rhCTGF(0、10、50ng/ml)干预足细胞24h,观察rhCTGF对ILK、nephrin及desmin表达影响的浓度效应.以浓度为50 ng/ml的rhCTGF干预足细胞0h、24h、48h,观察rhCTGF对ILK、nephrin及desmin表达影响的时间效应.分别用real time RT-PCR方法和Western blot方法检测ILK、nephrin及desmin mRNA表达水平和蛋白表达水平.采用扫描电镜技术观察rhCTGF对足细胞表面形态的影响. 结果:在基础状态下,足细胞表达其标志蛋白nephrin及少量desmin,10ng/ml rhCTGF可使desmin表达显著增加(P＜0.05),而nephrin表达显著下降(P＜0.05),随着rhCTGF浓度增加,desmin表达进一步增加(P＜0.05),而nephrin表达进一步减少(P＜0.05);rhCTGF刺激24h,足细胞desmin表达上调(P＜0.05),而nephrin表达下调(P＜0.05),48h,desmin表达进一步增加(P＜0.05),而nephrin表达进一步减少(P＜0.05).在基础状态下,足细胞表达一定量的ILK,rhCTGF能上凋足细胞ILK表达.扫描电镜显示,对照组足细胞胞体表面相对光滑,微绒毛较少;rhCTGF(50 ng/ml)刺激24h后,足细胞细胞表面形态发生改变,形成大量微绒毛. 结论:CTGF能引起足细胞nephrin表达下调,desmin表达上调,促进足细胞发生上皮-间充质转分化;CTGF能引起足细胞微绒毛化.同时,CTGF能诱导足细胞ILK表达增加,推测ILK表达上调可能是足细胞损害机制之一.