地西他滨联合丙戊酸钠促胃癌MGC-803细胞nm23-H1基因表达及机制研究

目的 探讨地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对胃癌细胞株MGC-803的作用及对non-metastasis 23-H1基因(nm23-H1)的表达调控的影响.方法 DCA 1.5及3.0 μmol·L-1-1VPA 1.5 mmol·L-1,DCA 1.5 μmol·L-1+VPA 1.5 mmol·L-1,DCA 3.0 μmol·L-1+VPA 1.5 mmo·L-1作用MGC-803细胞72 h.Annexin V/PI法检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测nm23-H1 mRNA表达,焦磷酸测序法检测nm23-H1启动子上随机选取的两个CpG岛位点甲基化状态.结果 VPA 1.5+DCA 1.5联合用药组[早期:(33.58±3.88)％,晚期:(3 1.52±4.20)％]和VPA 1.5 +DCA 3.0联合用药组[早期:(42.61±4.23)％,晚期:(38.01±3.86)％]凋亡率均高于其相应单药组,差异具有统计学意义(P＜0.01).nm23-H1 mRNA在VPA 1.5 +DCA 1.5联合用药组(1.84±0.46)和VPA 1.5 +DCA 3.0联合用药组(2.88±0.42)的表达水平均高于其相应单药组,差异具有统计学意义(P＜0.01).VPA 1.5 +DCA 1.5联合用药组[位点1:(53.50±3.39)％,位点2:(51.17±2.71)％]和VPA 1.5 +DCA 3.0联合用药组[位点1:(41.17±2.14)％,位点2:(39.83±2.56)％]nm23-H1启动子两位点甲基化阳性率均低于其相应单药组,差异具有统计学意义(P＜0.01).VPA 1.5 mmol·L-1、VPA 1.5+DCA 1.5、VPA 1.5+DCA 3.0这3组的HDAC酶活性均低于正常对照、DCA 1.5 μmol.L-1、DCA 3.0 μmol·L-1任一组,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论 DCA联合VPA能显著上调nm23-H1基因的表达,其机制与启动子上的甲基化水平降低和去乙酰化酶活性降低有关.