肺癌细胞系中肿瘤干细胞的分离鉴定与功能分析

背景:肿瘤干细胞在体外扩增和培养过程中如何保持其干细胞的特性成为肿瘤干细胞研究的重要障碍,从可长期稳定保存的细胞系中分离获得肿瘤干细胞可能成为肿瘤干细胞研究的可靠途径。目的:探讨遗传背景相似、转移特性不同的肺癌细胞中肿瘤干细胞的存在与否及其功能。方法:观察PLA-801D和PLA-801C细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用,以考察两株细胞的转移潜能;观察PLA-801D和PLA-801C细胞形成单细胞克隆的种类及每种细胞克隆的亚克隆种类和性能,判断两株细胞中是否存在肿瘤干细胞;采用胶原收缩实验考察两株细胞的生物力学重塑能力,即对细胞外基质的重塑能力。结果与结论:PLA-801D细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用均明显强于PLA-801C细胞(P<0.01)。PLA-801D可产生4种单细胞克隆,其中1种在传单细胞亚克隆后仍可形成如上4种克隆,而PLA-801C细胞中未发现有完全分化能力的细胞克隆。PLA-801D细胞的生物力学重塑能力也明显高于PLA-801C细胞(P<0.05)。结果证实具有高转移潜能的PLA-801D细胞中含有一小群具有自我更新和分化能力的肿瘤干细胞,且该细胞株的生物力学重塑性较好,提示该细胞株对细胞外基质的重塑性能较强。