二喹噁啉羟酸全抗原偶联比HPLC测定方法的建立

为建立一种准确、可靠的测定人工抗原偶联比方法,本试验应用高效液相色谱法方法测定全抗原二喹噁啉羟酸—牛血清白蛋白(QCA-BSA)合成中游离二喹噁啉羟酸的含量。采用Waters 2695分离系统、2489紫外检测系统;流动相:甲醇:水(60:40);柱温:30℃;流速:1 mL/min;检测波长320 nm。试验结果表明,游离二喹噁啉羟酸的线性范围为0.2～128μg/mL,线性方程为y=17526x+4648,R2=1,RSD为0.28%,全抗原QCA-BSAⅠ、Ⅱ、Ⅲ的偶联比分别为1.76:1、28.60:1、65.63:1。建立的方法准确、可靠,适用于喹噁啉类人工抗原偶联比的测定。