过表达KLF17对结直肠癌细胞SW480上皮-间质转化和体外侵袭能力的影响

World Chinese Journal of Digestology(2017)

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摘要
目的 研究KLF17基因转染对人结直肠癌细胞株SW480上皮-间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)和体外侵袭能力的影响.方法 将带有绿色荧光蛋白的重组KLF17表达质粒P1RES-EGFP-KLF17转染至SW480细胞中,以未转染质粒的SW480细胞作为对照,转染空载质粒的SW480细胞作为阴性对照.荧光定量PCR和Western blot法检测转染前后KLF17 mRNA和蛋白表达水平.采用QPCR和Westem blot检测转染前后SW480细胞EMT上皮标志物E钙黏素(E-cadherin)和间质标志物波形蛋白(Vimentin)的表达变化.用Transwell小室实验检测KL F17基因转染对SW480细胞的体外侵袭能力的影响.结果 KLF17转染48 h后SW480细胞中KLF17mRNA和蛋白表达水平(2.5087±0.0288;0.6100±0.05790)均较对照组(1.0000±0.0198;0.3543±0.0340)明显升高(均P<0.01);转染KLF17基因后,SW480细胞中E-cadherin mRNA和蛋白的表达量(2.0704±0.0620;0.5446±0.0245)较对照组均(1.0000±0.0106;0.3952±0.0430)均显著升高(均P<0.01),Vimentin mRNA和蛋白的表达量(0.4622±0.0279;0.3290±0.0367)较对照组(1.0000±0.0780;0.5229±0.0496)均显著降低(均P<0.01);转染KLF17基因后SW480细胞的体外侵袭能力(86.67个±10.97个)较对照组(145.30个±11.37个)及阴性对照组(135.33个±12.66个)均显著降低(均P<0.01).结论 KLF17基因可能通过抑制结直肠癌细胞EMT而降低其侵袭能力.
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关键词
KLF17,Colorectal cancer,Epithelial-mesenchymal transition,Invasion
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