NDPK B真核表达载体的构建及其对细胞生长活性的影响

Chinese Journal of Veterinary Science(2012)

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摘要
将目的基因NDPK B连接到pEGFP-N1真核表达载体,转染Vero细胞,通过增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和Western blotting分析,鉴定构建的pEGFP-NDPK B真核表达载体的正确性;利用生物信息学工具分析预测NDPKB蛋白的三维结构和可能存在的活性位点;MTT试验检测NDPK B对细胞生长活性的影响。结果显示,pEGFP-NDPK B真核表达载体构建成功,在Vero细胞中NDPK B和GFP蛋白能有效地融合表达。在线预测了NDPK B蛋白的三维结构和可能存在的活性位点。MTT试验结果表明,NDPK B对Vero细胞生长活性的抑制率为25.8%,对A549细胞生长活性的抑制率为22.7%。结果表明,NDPK B能够抑制细胞的生长,对细胞的凋亡具有正调节作用。
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关键词
cellular growth activity,3D structure,eukaryotic expression vector of pEGFP-NDPK B,fusion expression
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