蟑螂主要过敏原Blag7单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备蟑螂主要过敏原Bla g7的单克隆抗体(mAb).方法 用含编码Bla g7基因的大肠杆菌菌株Origami/pGS21a,诱导表达并纯化出Bla g7蛋白,以该蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗Bla g7 mAb;通过ELISA、Western blot技术鉴定mAb的特异性.结果 获得2株可稳定分泌抗Bla g7 mAb的杂交瘤细胞,分别命名为Bla g7-1和Bla g7-2;2株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类均为IgG1；经间接ELISA法测定,杂交瘤细胞Bla g7培养上清中mAb的效价分别为1:16000和1:8000; Western blot结果表明Bla g7单抗对Bla g7蛋白具有高度特异性.结论 成功地诱导表达Bla g7蛋白,并制备出抗Bla g7 mAb,为进一步研究蟑螂过敏提供了有用的实验工具.