抗人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及初步鉴定

为获得可用于免疫分析的人心肌肌钙蛋白I(cTnI)的单克隆抗体,用基因重组的cTnI免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用ELISA法筛选,有限稀释法进行克隆化。经2次融合,获得12株分泌cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA法测定腹水滴度大于1∶1×105,亲和常数大于1×108L/mol;此12株单克隆抗体与人心肌组织来源的cTnI可特异性结合,与cTnT、肌钙蛋白C(TnC)、人骨胳肌肌钙蛋白I(skTnI)、人骨胳肌肌钙蛋白T(skTnT)均无交叉反应。在这12株单克隆抗体中,有3株单抗可相互进行配对。该抗体的获得,为cTnI免疫诊断试剂的研发奠定了基础。