雌激素受体β基因小干扰RNA表达载体的构建及表达研究

目的构建针对人雌激素受体(estrogen receptor,ER)β基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)真核表达载体,转染人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblast cells,HPLFs)后观察其对ER-β基因表达的抑制作用。方法设计并合成针对ER-β基因siRNA的寡核苷酸序列,插入载体pSilencer3.1-H1-neo中形成重组载体。重组载体经测序鉴定后转染HPLFs,western blot检测转染前后ER-β蛋白的表达情况。结果测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对ER-β基因的siRNA表达载体。Western blot检测显示转染HPLFs后可使其ER-β蛋白表达显著下调。结论针对ER-β基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效抑制HPLFs中ER-β基因的表达。