MIA影响非洲爪蟾胚胎中胚层的形成

目的:探讨黑色素瘤抑制蛋白(melanoma inhibitory activity,MIA)在非洲爪蟾早期胚胎发育中的作用。方法:根据热带爪蟾MIA序列在非洲爪蟾EST数据库中找到MIA序列,利用RT-PCR扩增全长序列并克隆至pCS2+,用于测序。利用RT-PCR检测胚胎发育各阶段MIA mRNA的表达。通过显微注射特异的反义寡核苷酸morpholino(MO)敲降MIA;利用整胚原位杂交检测胚层标志性基因的表达。结果:克隆出非洲爪蟾MIA全长序列。在胚胎发育过程中MIA从受精卵开始持续表达。敲降MIA导致胚胎胚孔闭合延缓,中胚层标志基因xbra表达明显受抑,而内胚层标志性基因sox17α表达无明显改变。结论:MIA表达于非洲爪蟾胚胎发育各阶段,敲降MIA抑制中胚层的形成。