猕猴桃水提物诱导二相酶产生及抗氧化的机制研究

目的:本实验以人胃腺癌细胞株SGC-7901为模型,用猕猴桃水提物含药血清进行干预,探讨猕猴桃水提物诱导二相酶产生及抗氧化的机制。方法:取正常SD大鼠随机分为猕猴桃水提物高、中、低剂量组(用猕猴桃水提物溶液46.8,31.2,15.6 g.kg-1ig)和正常对照组(ig给予生理盐水)。连续14 d,每天ig 2次,于末次给药1 h,腹主动脉取血制备猕猴桃水提物含药血清。取对数生长期的SGC-7901细胞,在不同时间段分别给予相应的含药血清进行干预。用免疫组化法检测SGC-7901细胞内活化状态的核因子相关因子2(Nrf2)的细胞定位;RT-PCR法检测猕猴桃水提物高剂量组含药血清对SGC-7901细胞内二相酶mRNA水平的影响。结果:免疫组化法染色观察结果显示与正常对照组相比,猕猴桃水提物含药血清低、中、高剂量组均可提高Nrf2细胞核内的表达水平,颜色从浅黄色变为棕黄色。经积分统计学分析差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。RT-PCR检测结果显示与正常对照组相比较,猕猴桃水提物可明显诱导二相酶谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因的表达(P<0.05),且诱导谷胱甘肽-S-转移酶(GST)-P1和GST-T1基因表达作用差异有高度显著性(P<0.01),但对二相酶GST-M1和醌氧化还原酶(NQO1)基因水平影响不大。结论:猕猴桃水提物可促使Nrf2进入核内,导致二相酶的表达增加,具有诱导细胞解毒抗氧化作用。